多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1通过激活NF-κB途径导致高糖人视网膜血管内皮细胞凋亡
近期，大连医科大学附属第一医院眼科研究人员发表论文，旨在探讨多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1[poly（adenosinediphosphate-ribose）polymeras-1，PARP-1]和核因子-B（nuclearfactor-B，NF-B）在高糖人视网膜血管内皮细胞（retinalvascularendothelialcells，RVEC）中的相互作用及其在人RVEC中的表达定位及
近期，大连医科大学附属第一医院眼科研究人员发表论文，旨在探讨多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1[poly（adenosine diphosphate-ribose）polymeras-1，PARP-1]和核因子-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）在高糖人视网膜血管内皮细胞（retinal vascular endothelial cells，RVEC）中的相互作用及其在人RVEC中的表达定位及作用机制。研究指出，PARP-1和NF-κB是相互作用的蛋白质，血糖增高时，PARP-1可能进入细胞核内并结合同时进入细胞核的NF-κB，激活NF-κB信号通路，引起RVEC凋亡，导致DR的发生。该文发表在2015年第02期《眼科新进展》杂志上。
体外培养人RVEC及HEK293T细胞，并进行传代，同时构建高糖人RVEC细胞模型。构建PARP-EGFP及Flag-NF-κB质粒，酶切鉴定后转染高糖培养的人RVEC，Western blot法检测重组质粒表达目的基因的效果，并应用Western blot法和免疫共沉淀法检测高糖人RVEC中PARP-1和NF-κB的相互作用。PARP-EGFP和Flag-NF-κB质粒共转染人RVEC，激光共聚焦扫描显微镜检测PARP-1和NF-κB在高糖人RVEC中的定位及其相互作用。
人RVEC复苏后24 h贴壁，细胞呈扁平梭形，3 d左右细胞开始融合呈铺路石样，单层生长，铺满瓶底，并可见接触抑制现象。成功构建PARP-EGFP及Flag-NF-κB质粒，并有效表达目的基因。免疫共沉淀结果显示PARP-1和NF-κB是相互作用的蛋白质，高糖组NF-κB p50的条带比正常对照组明显增粗，并且高糖情况下PARP-1结合NF-κB的量较正常对照组明显增加。激光共聚焦扫描显微镜结果显示PARP和NF-κB均表达于正常的人RVEC的细胞核和核周区域，当受到高浓度葡萄糖影响后，PARP-1和NF-κB均集中表达于细胞核内，尤以NF-κB最显著。
相关链接：http://med.wanfangdata.com.cn/Journal/ykxjz.aspx
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