眼科

遗传眼病永生化细胞系建立方法

作者:杨俊岭 整理 来源:金宝搏网站登录技巧 日期:2015-09-16
导读

           近期,天津医科大学眼科临床学院研究人员发表论文,旨在通过遗传眼病患者的外周血或皮肤组织建立永生化细胞系,以保存其遗传资源。研究指出,通过遗传眼病患者的外周血和皮肤组织可建立永生化B淋巴细胞系和皮肤成纤维细胞系以保存其全部遗传信息,为进一步研究相关遗传性眼病奠定物质基础。该文发表在2014年第12期《眼科新进展》杂志上。   永生化B淋巴细胞系的建立:抽取患者静脉血,分离淋巴细胞,以EB病毒体

  近期,天津医科大学眼科临床学院研究人员发表论文,旨在通过遗传眼病患者的外周血或皮肤组织建立永生化细胞系,以保存其遗传资源。研究指出,通过遗传眼病患者的外周血和皮肤组织可建立永生化B淋巴细胞系和皮肤成纤维细胞系以保存其全部遗传信息,为进一步研究相关遗传性眼病奠定物质基础。该文发表在2014年第12期《眼科新进展》杂志上。

  永生化B淋巴细胞系的建立:抽取患者静脉血,分离淋巴细胞,以EB病毒体外转化B淋巴细胞为类淋巴母细胞,利用环孢霉素A抑制T淋巴细胞RNA聚合酶Ⅱ活性,防止已转化B淋巴细胞因受到T淋巴细胞的攻击而退化,培养后建立永生化B淋巴细胞系;皮肤成纤维细胞原代培养:利用DispaseⅡ酶处理离体皮肤组织以分离表皮组织,将其余组织剪碎后贴瓶培养,成纤维细胞可从组织块爬出,生长成为细胞系。

  永生化B淋巴细胞系:共完成标本17例,成功建系15例,成功率88.2%;经过转化后B淋巴细胞悬浮生长,胞浆丰富、形态各异,聚集成团,可无限传代用于实验研究。皮肤成纤维细胞原代培养:共完成标本5例,成功建系3例,成功率60.0%;皮肤成纤维细胞贴壁生长,呈典型纺锤形,中间饱满,两边细长,50代以内增殖旺盛可用于实验研究。

   相关链接:http://med.wanfangdata.com.cn/Journal/ykxjz.aspx

  

  

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