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视网膜酸化诱导VEGF与PEDF表达及其与氧化应激的关系

作者：董静文整理来源：金宝搏网站登录技巧日期：2012-10-31

导读

日前，上海交通大学医学院附属第九人民医院眼科和上海交通大学附属第一人民医院眼科的研究人员共同发表文章，旨在探讨视网膜酸中毒对视网膜血管内皮生长因子(VEGF)与色素上皮衍生因子(PEDF)表达的影响及氧化应激的作用。研究表明，视网膜酸化诱导VEGF的表达受到氧化应激的调节，抗氧化剂可促进酸化视网膜PEDF的表达增加，表明氧化应激可抑制PEDF表达。该文章发表在《中华实验眼科杂志》2012年第30卷第4期上。

关键字：视网膜 | 酸中毒 | 血管内皮生长因子 | 色素上皮衍生因子 | 抗氧化剂

　　该研究从2周龄雄性SD大鼠中分离出视网膜。分别在NaHCO3调制的pH7.2、6.8、6.5酸性环境的DMEM培养液中培养24 h；另外，在上述酸性培养液中培养后用PBS洗涤视网膜2遍后置于pH值为7.2的新鲜培养液中继续培养24 h；同时，在上述酸性培养液中加入抗氧化剂对视网膜进行培养。制作视网膜标本，然后行苏木精-伊红染色，采用荧光定量聚合酶链反应( PCR)及免疫蛋白印迹技术检测各组大鼠视网膜中VEGF和PEDF蛋白及其mRNA的表达，以pH7.2作为对照。

　　结果显示，视网膜培养24 h后，pH7.2组、pH6.8组视网膜层次清晰，但pH6.5组视网膜出现空泡。正常视网膜VEGF mRNA的表达为(112±11)％，pH7.2组为(100±7)％，差异无统计学意义(P=0.55)；pH 6.8组、pH 6.5组中的视网膜VEGF mRNA分别为(196±43)％、(251±29)％，均较pH7.2组明显升高，差异均有统计学意义(P＜0.05)。正常视网膜PEDF mRNA水平为(86±19)％，pH7.2组为(100±。33)％，差异无统计学意义(P=0.64)；pH 6.5组视网膜PEDF mRNA水平为(230±66)％，较pH7.2组明显升高(P＜0.05)。VEGF与PEDF蛋白与其mRNA表达趋势一致。视网膜酸化纠正后，pH 7.2、6.8、6.5组视网膜VEGF mRNA分别为(100±13)％、(111±9)％、(113±9)％，3个组之间比较差异无统计学意义(F=2.51，P=0.16)。PEDF mRNA的表达分别为(100±13)％、(110±9)％、(108±11)％，3个组之间比较差异无统计学意义(F=0.98，P=0.43)。加入抗氧化剂后，pH7.2组视网膜VEGF mRNA水平为(100±9)％，pH6.8组为(106±7)％，pH 6.5组为(148±22)％，pH6.5组VEGF mRNA表达水平均明显高于pH 7.2组和pH 6.8组(P＜0.05)。pH 7.2、6.8、6.5组大鼠视网膜PEDF mRNA表达分别为(100±31)％、(282±45)％、(480±117)％，差异有统计学意义(F=20.73，P=0.00)。