非致死性过氧化氢持续性损伤对视网膜色素上皮细胞连接的影响
日前，上海交通大学附属第一人民医院眼科张红梅 、宫媛媛、吴星伟等共同发表文章，旨在探讨非致死性H2O2持续性损伤对RPE细胞连接的影响。研究表明，非致死性H2O2持续性损伤对RPE细胞连接有破坏作用。该文章发表在《中华实验眼科杂志》2012 年第30卷第3期上。
日前，上海交通大学附属第一人民医院眼科张红梅 、宫媛媛、吴星伟等共同发表文章，旨在探讨非致死性H2O2持续性损伤对RPE细胞连接的影响。研究表明，非致死性H2O2持续性损伤对RPE细胞连接有破坏作用。该文章发表在《中华实验眼科杂志》2012 年第30卷第3期上。
该研究将ARPE-19细胞株以8×104个/L的密度接种在96孔板中，在24孔板中细胞爬片的接种密度为4×104个/L，并在DMEM/F12培养液中培养，无血清培养液饥饿培养24 h后用于实验。将不同浓度(0～0.60 mmol/L)的H2O2加入培养液，单溶液细胞增生(MTS)法检测不同浓度H2O2持续性损伤对RPE细胞活力的影响；用Transwell小室法培养细胞，跨上皮细胞电阻(TER)法检测细胞单层的形成时间；以罗丹明-异硫氰酸荧光素标记葡聚糖的量测定H2O2对RPE细胞单层通透性的影响；免疫荧光法检测RPE细胞之间紧密连接蛋白ZO-1的表达情况。
结果显示，不同质量浓度H2O2作用组细胞活力(A490值)的差异有统计学意义(F=991.501，P=0.000)，0.20～0.60 mmol/L H2 02组细胞活力明显低于对照组，差异均有统计学意义(t=3.200、11.368、4.256、2.929、10.818、15.433、64.125、98.805，P＜0.05)。ARPE-19细胞接种于Transwell小室后l1d时TER值为(24.9±1.3)Ω •cm2，7d时为(17.8±1.4)Ω•cm2，差异有统计学意义(t=5.228，P=0.014)；至第15天左右达到稳定水平，约为(25.9±0.9)Ω•cm2.细胞通透性检测表明，无细胞的空白组葡聚糖渗漏量(相对荧光强度)为433.08±51.53，无H2O2的对照组渗漏量为255.39±16.44，明显低于空白组，差异有统计学意义(t=12.515，P=0.006)；H2O2处理的实验组渗漏量为363.28±26.17，较对照组渗漏增加，差异亦有统计学意义(t=14.412，P=0.005)。免疫荧光检测可见无H2O2对照组细胞ZO-1连接完整，H2O2组较无H2O2对照组细胞ZO-1连接呈断裂状。
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