日前,第二军医大学济南临床医学院,济南军区总医院眼科王光洁、蒋华共同发表文章,旨在 确定JAM-1在大鼠角膜上皮层、基质层和内皮层的构成。研究表明,JAM-1作为细胞连接的构成成分,在角膜上皮层、内皮层和基质层均有表达,但其表达的形态和水平因组织层次的不同而不同。该文章发表在《中华实验眼科杂志》2012 年第30卷第3期上。
日前,第二军医大学济南临床医学院,济南军区总医院眼科王光洁、蒋华共同发表文章,旨在 确定JAM-1在大鼠角膜上皮层、基质层和内皮层的构成。研究表明,JAM-1作为细胞连接的构成成分,在角膜上皮层、内皮层和基质层均有表达,但其表达的形态和水平因组织层次的不同而不同。该文章发表在《中华实验眼科杂志》2012 年第30卷第3期上。
该研究选取4只SPF级Wistar大鼠,2只用于JAM-1基因在角膜组织中表达的逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测,另2只用于免疫组织化学检测。动物过量麻醉处死后获得角膜组织并制备角膜上皮、基质和内皮标本,RT-PCR法检测角膜标本中JAM-1、occludin和claudin-1 mRNA的表达。反应产物行质量分数1.5%琼脂糖凝胶电泳并用凝胶成像系统进行分析。用兔抗鼠JAM-1单克隆抗体对角膜石蜡切片、上皮及内皮铺片行免疫组织化学检测,评估JAM-1蛋白在大鼠角膜组织各层的表达部位和表达强度。
结果显示,在大鼠角膜各层均可检测到JAM-1、occludin和claudin-1 mRNA的表达,PCR熔解曲线为清晰的单峰。角膜组织各层中JAM-1 mRNA表达水平与occludin mRNA相似,均高于claudin-1 mRNA。3种黏附分子均在上皮层表达最强,角膜基质层表达较弱。免疫组织化学检测显示,JAM-1蛋白在角膜各层均有明确的阳性染色,角膜上皮基底层的表达强于基质层和内皮层。角膜上皮、内皮铺片检测显示,JAM-1蛋白主要表达于上皮细胞和内皮细胞的连接部位,而角膜内皮中JAM-1蛋白的阳性染色广泛而弥散。
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