水痘-带状疱疹病毒糖蛋白E胞外域基因的真核细胞稳定表达及其免疫反应性的初步研究
近期，安徽医科大学微生物学教研室研究人员发表论文，旨在真核细胞稳定表达水痘-带状疱疹病毒（VZV）糖蛋白E（gE）的胞外域基因，应用gE抗原建立VZV感染的血清学试验来评价VZV疫苗的免疫效果。研究指出，本实验获得稳定高效表达VZVgE胞外域基因的COS-7细胞株，建立的ELISA血清学检测方法有助于VZV感染的流行病学研究和对易感人群VZV感染的诊断和预防。该文发表在2015年第03期《安
近期，安徽医科大学微生物学教研室研究人员发表论文，旨在真核细胞稳定表达水痘-带状疱疹病毒（VZV）糖蛋白E（g E）的胞外域基因，应用g E抗原建立VZV感染的血清学试验来评价VZV疫苗的免疫效果。研究指出，本实验获得稳定高效表达VZV g E胞外域基因的COS-7细胞株，建立的ELISA血清学检测方法有助于VZV感染的流行病学研究和对易感人群VZV感染的诊断和预防。该文发表在2015年第03期《安徽医科大学学报》杂志上。
构建含有VZV g E胞外域基因的真核表达质粒p CDNA3.1-g E，测序后脂质体转染COS-7细胞，经G418筛选出稳定表达VZV g E的细胞株。采用RT-PCR法检测VZV g E的mRNA，Western blot和间接免疫荧光法检测g E的免疫反应性，表达产物经Ni2+-NTA柱纯化后包被ELISA板，对127份0～10岁正常儿童血清中VZV-Ig G抗体水平进行检测。
成功筛选出能够稳定表达VZV g E胞外域基因的COS-7细胞株，RT-PCR检测到g E的mRNA，经Western blot和间接免疫荧光鉴定，g E具有明显的免疫反应性，COS-7细胞株和其培养上清液中均有g E融合蛋白，表达量约为0.632 mg/ml，纯度约为90%。ELISA实验检测了127份0～10岁儿童血清中VZV-Ig G抗体，总阳性率为81.89%，特异度和灵敏度分别为93.75%和88.24%。
评论
我要跟帖
