金纳米探针结合PCR检测HIV-1 p24抗原的研究
日前，中国疾病预防控制中心性艾中心参比实验室的董华凰、刘建礼和张桂云等人共同发表论文，旨在建立以金纳米探针结合终端PCR技术超灵敏检测HIV-1 p24抗原的方法。研究指出金纳米探针结合PCR凝胶电泳法可以对HIV-1 p24抗原进行检测，与ELISA法比较，其灵敏度可提高3个数量级。该文章发表在2012 年35卷05期《中华检验医学杂志》上。
日前，中国疾病预防控制中心性艾中心参比实验室的董华凰、刘建礼和张桂云等人共同发表论文，旨在建立以金纳米探针结合终端PCR技术超灵敏检测HIV-1 p24抗原的方法。研究指出金纳米探针结合PCR凝胶电泳法可以对HIV-1 p24抗原进行检测，与ELISA法比较，其灵敏度可提高3个数量级。该文章发表在2012 年35卷05期《中华检验医学杂志》上。
采用单克隆抗体1G12和1D4建立的夹心ELISA法检测合成的HIV-1 p24抗原。挑选拟南芥基因组中一段47 bp的DNA作为条形码DNA，与5′端修饰巯基的捕获DNA(条形码DNA的互补序列)杂交形成双链DNA。在金纳米粒子表面连接1D4，并与双链DNA通过巯基连接,制成金纳米探针。微孔板上包被1G12，与待检的重组HIV-1 p24抗原及金纳米探针夹心结合。将结合的条形码DNA通过加热解离下来作为检测信号，设计并合成引物进行PCR检测及4％凝胶电泳分析，进而鉴定p24抗原的含量，然后与ELISA法灵敏度进行比较。
采用单克隆抗体1G12和1D4建立夹心ELISA法，检测HIV-1 p24抗原最低检测限为1000 pg/ml，采用相同抗体对建立金纳米探针法，通过PCR凝胶电泳法间接检测HIV-1 p24抗原，显示PCR产物电泳条带的强弱与所检测p24抗原含量具有良好的对应关系，最低检测限可达到1 pg/ml。
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