叉头状转录因子O1基因过表达慢病毒载体构建及其大鼠系膜细胞株的建立
近期，郑州大学第一附属医院老年内分泌科研究人员发表论文，旨在构建含组成性激活突变型FoxO（CA-FoxO11）基因的过表达慢病毒载体，并建立其过表达的大鼠肾小球系膜细胞株。研究指出，成功构建了大鼠FoxO1基因的过表达慢病毒载体，并建立了稳定过表达FoxO1的大鼠肾小球系膜细胞株，为进一步研究FoxO1的功能和作用机制奠定了研究基础。该文发表在2015年第04期《中国现代医学杂志》上。
近期，郑州大学第一附属医院老年内分泌科研究人员发表论文，旨在构建含组成性激活突变型Fox O（CA-Fox O1 1）基因的过表达慢病毒载体，并建立其过表达的大鼠肾小球系膜细胞株。研究指出，成功构建了大鼠Fox O1基因的过表达慢病毒载体，并建立了稳定过表达Fox O1的大鼠肾小球系膜细胞株，为进一步研究Fox O1的功能和作用机制奠定了研究基础。该文发表在2015年第04期《中国现代医学杂志》上。
通过四质粒合成法构建包含CA-Fox O1编码序列的过表达慢病毒载体（LV-CA-Fox O1）。实验分为3组：空白对照组（NC组）、空慢病毒载体阴性对照组（LV-empty-Fox O1组）和过表达慢病毒载体组（LV-CA-Fox O1组）。培养系膜细胞（RMCs）72 h后，用流式细胞仪检测RMCs中绿色荧光蛋白（GFP）阳性率，并采用实时荧光定量PCR及蛋白免疫印迹法检测Fox O1的m RNA及蛋白表达情况。
成功构建LV-CA-Fox O1，其病毒滴度为1×108TU/ml。LV-empty-Fox O1组和LV-CA-Fox O1组GFP阳性率分别为84.5%和81.4%；与NC组相比，LV-CA-Fox O1组Fox O1的m RNA与蛋白表达量相当于NC组的27.92倍与5.41倍（均P<0.05）；而NC组与LV-empty-Fox O1组Fox O1的m RNA及蛋白表达量差异均无统计学意义。
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