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低氧诱导人视网膜血管内皮细胞中乙酰肝素酶和血管内皮生长因子相关性研究

作者：董静文整理来源：金宝搏网站登录技巧日期：2012-10-20

导读

日前，中山大学中山眼科中心，眼科学国家重点实验室、昆明医学院附属第一医院眼科的研究人员共同发表文章，旨在观察人视网膜血管内皮细胞(HREC)低氧模型中乙酰肝素酶(Hpa)、血管内皮生长因子( VEGF)和RNA聚合酶-Ⅱ(Pol-Ⅱ)的表达变化，探讨低氧性视网膜新生血管形成中Hpa和VEGF的相关性及可能机制。研究表明，低氧诱导的HREC中，Hpa的表达增高，导致VEGF的增加，促进了视网膜新生血管形成。该文发表在《中华眼底病杂志》2012 年第28卷第1期上。

关键字：视网膜新生血管化/病理生理学 | 血管内皮生长因子类 | 缺氧 | 视网膜血管 | 内皮细胞

　　该研究使用低氧模拟剂氯化钴(CoCl2)造成HREC低氧模型，分为4组，分别为正常对照组、低氧诱导组、磷酸甘露戊糖硫酸盐(PI-88)组和空白对照组。低氧诱导组为含CoCl2 100 μmol/ml的培养液培养48 h；PI 88组为含CoCl2 100 μmol/L和Hpa竞争性抑制剂PI-88 5 μg/ml的培养液干预48 h；空白对照组为等量PBS干预HREC 48 h。免疫荧光染色法观察正常对照组和低氧诱导组HREC中Hpa、VEGF以及PolⅡ的表达。蛋白质免疫印迹(Western blot)检测各组间Hpa和VEGF蛋白表达变化。

　　结果显示，免疫荧光染色结果显示，低氧诱导组HREC细胞质内Hpa荧光和VEGF荧光均较正常对照组增强；PI-88组细胞质内VEGF荧光较低氧诱导组减弱。低氧诱导组细胞核内Hpa较正常对照组明显增强，且分布与Pol-Ⅱ相吻合。Western blot检测结果显示，与正常对照组比较，低氧诱导组Hpa蛋白和VEGF蛋白表达均明显升高，差异有统计学意义(Hpa：F=-4.005，P＜0.05；VEGF：F=-4.063，P＜0.05)；PI-88组VEGF蛋白表达较低氧诱导组VEGF蛋白表达降低，差异有统计学意义(F=5.963，P＜0.05)。