近期，武汉大学中南医院呼吸内科研究人员发表论文，旨在观察碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）反义寡核苷酸（AODN）对大鼠肺成纤维细胞增殖、转化信号通路的影响。研究指出，bFGF反义寡核苷酸可抑制肺成纤维细胞的增殖、转化及胶原合成，bFGF反义寡核苷酸可能通过下调TGF-β1-Smad信号通路来发挥作用。该文发表在2015年第02期《武汉大学学报（医学版）》杂志上。

　　分离成年大鼠肺成纤维细胞，分为4组：对照组（未转染肺成纤维细胞）；TGF-β1组（未转染肺成纤维细胞+5ng/ml TGF-β1刺激）；TGF-β1+AODN组（转染AODN肺成纤维细胞+5ng/ml TGF-β1刺激）；TGF-β1+RODN（正义寡核苷酸）组（转染RODN肺成纤维细胞+5ng/ml TGF-β1刺激）。每组设3复孔，并作细胞爬片，镜下计数肺成纤维细胞数量，绘制生长曲线。MTT比色法测定肺成纤维细胞增殖率。免疫细胞化学方法检测肌成纤维细胞特异性标志物α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）。通过ELISA法检测培养液中bFGF、CTGF及Ⅰ型胶原蛋白含量。用RT-PCR法分析肺成纤维细胞Smad3 mRNA、Smad7 mRNA、Ⅰ型胶原mRNA表达水平。

　　1细胞计数显示：TGF-β1+RODN组各时段成纤维细胞的数目均较对照组、TGF-β1组、TGF-β1+AODN组明显增多（P<0.05）；TGF-β1+AODN组中成纤维细胞增殖数比TGF-β1组明显减低（P<0.05）。2MTT结果显示：TGF-β1+RODN组肺成纤维细胞光密度值明显高于对照组、TGF-β1组、TGF-β1+AODN组（P<0.05）；TGF-β1+AODN组中肺成纤维细胞光密度值明显比TGF-β1组减低（P<0.05）。3免疫细胞化学染色结果显示：TGF-β1+RODN组肺成纤维细胞与对照组、TGF-β1组、TGF-β1+AODN组比较，α-SMA染色的平均光密度值（IOD）明显增加（P<0.05）；TGF-β1+AODN组中肺成纤维细胞α-SMA染色的平均光密度值（IOD）比TGF-β1组明显减低（P<0.05）。4 ELISA法检测结果显示：在TGF-β1+RODN组肺成纤维细胞培养液中bFGF、CTGF及Ⅰ型胶原蛋白含量明显高于对照组、TGF-β1组、TGF-β1+AODN组（P<0.05）；TGF-β1+AODN组肺成纤维细胞培养液中bFGF、CTGF及Ⅰ型胶原蛋白含量比TGF-β1组明显减低（P<0.05）。5RT-PCR法检测结果显示：在TGF-β1+RODN组肺成纤维细胞Smad3mRNA及Ⅰ型胶原蛋白mRNA表达明显高于对照组、TGF-β1组、TGF-β1+AODN组（P<0.05）；TGF-β1+AODN组肺成纤维细胞Smad3mRNA及Ⅰ型胶原蛋白mRNA表达明显比TGF-β1组明显减低（P<0.05）；TGF-β1+RODN组肺成纤维细胞Smad7mRNA表达明显低于对照组、TGF-β1组、TGF-β1+AODN组（P<0.05）；TGF-β1+AODN组肺成纤维细胞Smad7 mRNA表达比TGF-β1组明显增加（P<0.05）。

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