经MHCⅡ通路的屋尘螨1类变应原T细胞表位融合肽疫苗载体的构建与表达
近期，皖南医学院医学寄生虫学教研室研究人员发表论文，旨在构建经MHCⅡ通路的屋尘螨1类变应原Derp1的T细胞表位肽疫苗重组载体。研究指出，成功构建了可表达经MHC通路的编码Derp1的3段T细胞表位的重组pET-28a-TAT-IhC-Derp1-3T载体，纯化的TAT-IhC-Derp1-3T具有较强的IgE结合能力，从而为后续经MHC通路的特异性免疫治疗奠定基础。该文发表在2015年第
近期，皖南医学院医学寄生虫学教研室研究人员发表论文，旨在构建经MHCⅡ通路的屋尘螨1类变应原Der p 1的T细胞表位肽疫苗重组载体。研究指出，成功构建了可表达经MHC通路的编码Der p 1的3段T细胞表位的重组p ET-28a-TAT-Ih C-Der p 1-3T载体，纯化的TAT-Ih C-Der p 1-3T具有较强的Ig E结合能力，从而为后续经MHC通路的特异性免疫治疗奠定基础。该文发表在2015年第02期《南方医科大学学报》杂志上。
分别合成TAT、Ih C和含编码Der p 1的3段T细胞表位的融合核苷酸序列，用特异性引物PCR扩增相应的基因片段，分别用相应的双酶切后，用T4 DNA连接酶连接形成TAT-Ih C-Der p 1-3T融合基因，并插入至原核表达载体p ET-28a（+）中，构建重组原核表达载体p ET-28a（+）-TATIh C-Der p 1-3T，Bam HⅠ和XhoⅠ进行双酶切和测序鉴定。重组载体转化大肠杆菌E.coli BL21（DE3）菌株，IPTG诱导后，经SDS-PAGE电泳分析和Western blot验证，纯化TAT-Ih C-Der p 1-3T蛋白后进行Ig E结合试验。
双酶切和测序结果表明，成功构建了p ET-28a-TAT-Ih C-Der p 1-3T重组原核表达载体；SDS-PAGE电泳分析显示TAT-Ih C-Der p 1-3T可诱导表达；Western blot检测表明该融合蛋白纯化成功；Ig E结合试验表明TAT-Ih C-Der p 1-3T结合屋尘螨过敏病人血清Ig E的能力强于Der p 1变应原（P<0.001）。
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