反枝苋花粉泛过敏原profilin基因的克隆表达、纯化及免疫学鉴定
作者：杨俊岭 整理 来源： 日期：2015-05-12
导读
近期，赣南医学院病原生物学教研室研究人员发表论文，旨在克隆表达反枝苋花粉中泛变应原肌动蛋白抑制蛋白（profilin），并鉴定其免疫学活性。研究指出，成功地克隆和表达了反枝苋花粉profilin，并具有良好的IgE应答免疫活性。该文发表在2014年第12期《南昌大学学报（医学版）》杂志上。 利用RT-PCR结合RACE技术克隆反枝苋花粉泛变应原profilin的全长基因，并进行序列分析。
近期，赣南医学院病原生物学教研室研究人员发表论文，旨在克隆表达反枝苋花粉中泛变应原肌动蛋白抑制蛋白（profilin），并鉴定其免疫学活性。研究指出，成功地克隆和表达了反枝苋花粉profilin，并具有良好的Ig E应答免疫活性。该文发表在2014年第12期《南昌大学学报（医学版）》杂志上。
利用RT-PCR结合RACE技术克隆反枝苋花粉泛变应原profilin的全长基因，并进行序列分析。设计带有酶切位点的特异性引物，采用RT-PCR获得整个反枝苋花粉profilin的开放阅读框，将其与p ET28a载体连接并转化大肠杆菌BL21（DE3）进行诱导表达，Ni2+亲和层析柱纯化重组蛋白，采用Western-blot检测其Ig E结合活性。
c DNA核苷酸测序表明反枝苋花粉profilin的全长基因由675个碱基组成，开放阅读框为399 bp，编码131个氨基酸。重组反枝苋花粉profilin在大肠杆菌中可溶性表达，进一步经Western-blot检测具有良好的Ig E结合活性。
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