骨科

线粒体在压力诱导的椎间盘髓核细胞凋亡中的作用

作者:华中科技大学附属协和医院骨科邵增务 丁凡等 来源:武汉国际骨科高峰论坛论文汇编 日期:2012-09-23
导读

         该压力不仅能抑制髓核细胞细胞外基质蛋白合成代谢,而且还诱导髓核细胞凋亡。且其诱导的髓核细胞凋亡可能部分通过线粒体凋亡途径所介导。线粒体途径介导的髓核细胞凋亡可能是椎间盘发生退行性改变的重要机制。

  目的:本研究的目的在于观察线粒体途径是否参与了压力诱导的兔髓核细胞凋亡这一病理过程中。

  方法:可控加压装置用于观察持续压力(压力强度为1.0Mpa)对单层培养髓核细胞行压力负荷6, 12, 18, 24及36h后造成的生物学效应。细胞活力情况通过细胞计数试剂盒CCK-8检测,细胞凋亡率通过流式细胞仪进行分析,倒置相差显微镜观察细胞的形态学改变,凋亡相关的基因和蛋白表达分别通过实时荧光定量PCR和Western-blot来进行分析。Western-blot检测细胞外基质Ⅱ型胶原和蛋白多糖的蛋白表达。细胞线粒体功能主要通过线粒体膜通透孔、活性氧及线粒体膜电位进行分析。

  结果:该压力强度在上述时间点内能使细胞活力明显降低、细胞外基质Ⅱ型胶原和蛋白多糖的蛋白表达减少,且能诱导兔椎间盘髓核细胞发生凋亡改变。而且该压力能显著抑制髓核细胞线粒体功能,表现为细胞线粒体膜通透孔的开放、活性氧的过度产生及线粒体膜电位的降低。

  结论:该压力不仅能抑制髓核细胞细胞外基质蛋白合成代谢,而且还诱导髓核细胞凋亡。且其诱导的髓核细胞凋亡可能部分通过线粒体凋亡途径所介导。线粒体途径介导的髓核细胞凋亡可能是椎间盘发生退行性改变的重要机制。

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