生长分化因子5诱导骨髓间充质干细胞微团成软骨分化的研究
作者：华中科技大学附属协和医院骨科孙志博杨述华等 来源：武汉国际骨科高峰论坛论文汇编 日期：2012-09-23
导读
经一定浓度GDF-5 诱导的hMSCs微团，II型胶原和蛋白多糖表达呈浓度依赖性增加，具有软骨的部分生物学功能。
[目的] 探讨应用生长分化因子5 (growth differentiation factor 5, GDF-5) 诱导人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells, hMSCs) 微团成软骨分化的可行性及效果。
[方法] 体外分离培养hMSCs，取第三代细胞实验。将hMSCs分别用无血清H-DMEM和含10，20，50，100 ng/ml GDF-5的软骨诱导液（chondrogenic medium, CM）诱导,显微镜下观察细胞形态变化，MTT法检测各组细胞的增殖情况。诱导2周后重悬细胞，以5×106/ml的细胞密度离心构建微团，继续诱导2周。RT-PCR检测两组细胞II型胶原mRNA的表达。免疫组化、甲苯胺蓝染色检测II型胶原和蛋白多糖表达。
[结果] hMSCs呈梭形、漩涡状生长。100 ng/ml GDF-5诱导的hMSCs呈圆形或多角形。五组微团分别由无血清H-DMEM、含10，20，50，100 ng/ml GDF-5的软骨诱导液诱导2周后，除H-DMEM组无II型胶原mRNA、II型胶原蛋白和蛋白多糖的表达外，其它各组II型胶原mRNA、II型胶原蛋白和蛋白多糖的表达呈浓度依赖性增加，各组差异均有统计学意义（P < 0.05）。
[结论] 经一定浓度GDF-5 诱导的hMSCs微团，II型胶原和蛋白多糖表达呈浓度依赖性增加，具有软骨的部分生物学功能。
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