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[中国心脏大会]Islet-1介导组蛋白乙酰化修饰对心脏发育相关转录因子的

作者：重庆医科大学附属儿童医院余仲苏等来源：中国心脏大会2012论文集日期：2012-08-13

导读

目的：组蛋白乙酰化为常见的表观遗传方式。本课题组前期研究发现，心脏发育相关转录因子受到组蛋白乙酰化的调控，而组蛋白乙酰化状态则通过组蛋白乙酰化酶(HATs)和组蛋白去乙酰化酶(HDACs)调节。然而，组蛋白乙酰化并没有特异性，在心脏发育过程中是否存在辅助因子，协助HATs识别心脏发育相关转录因子以介导其启动子区组蛋白的乙酰化？Islet-1为心脏发育早期的重要转录因子，其结构符合该辅助因子的需求。本研究探讨Islet-1是否作为此种辅助因子介导组蛋白乙酰化参与心脏发育相关转录因子的调控。方法：

　　方法：培养心肌祖细胞，以转染Islet-1 RNAi慢病毒作为Islet-1抑制组，转染空载体慢病毒作为空载体对照组，未转染慢病毒作为空白对照组。Q-PCR检测心脏发育相关转录因子mRNA的表达水平。通过Western blot检测组蛋白H3乙酰化水平。运用 ChIP-Q-PCR检测转录因子启动子区乙酰化水平及与p300结合情况。

　　结果：Q-PCR结果显示 Islet-1 抑制组中心脏发育相关转录因子Islet-1、Mef2c、Tbx5 的mRNA相对表达量与空白对照组和空载体对照组相比有明显降低（P < 0.05）。而 Gata4 的mRNA相对表达量各组间差异不具有统计学意义（P >0.05）。Western blot结果显示空白对照组、空载体对照组及 Islet-1 抑制组之间组蛋白H3乙酰化水平没有明显变化，差异不具有统计学意义（P >0.05）。ChIP-Q-PCR 结果提示Islet-1抑制组中Mef2c启动子组蛋白乙酰化水平及与p300结合情况较空白对照组和空载体对照组有降低（P <0.05），而Gata4、Tbx5 的启动子组蛋白乙酰化水平及与p300结合情况各组间则没有统计学差异（P <0.05）。

　　结论：以上数据表明，抑制Islet-1可能降低 p300 与 Mef2c 启动子区的结合，从而下调 Mef2c 启动子区乙酰化水平，进而影响 Mef2c 的表达。Islet-1作为辅助因子介导组蛋白乙酰化参Mef2c的调控。但 Gata4、Tbx5 可能并非通过该途径而受到组蛋白乙酰化的调控，其调控方式仍需进一步研究。