心血管

[中国心脏大会] 新型非去极化停跳液对心肌细胞离子通道影响

作者:国家心血管病中心北京阜外心血管病医院吴蓓黑飞龙龙村等 来源:中国心脏大会论文汇编 日期:2012-08-12
导读

         结论:心脏停跳液可减轻由缺血再灌注损伤后心肌细胞的钠通道电流和L-型钙电流强度,有效减少钠离子和钙离子的内流,降低细胞内钙、钠超载,减轻心肌缺血再灌注损伤。与高钾ST液相比,HTK液和非去极化NDP液的这种保护作用更明显。NDP液的保护效果优于HTK液,但需加大样本量并结合分子生物学方法深入探讨。

  一种新型非去极化停跳液缺血再灌注心肌细胞离子通道特性的影响

  目的:利用全细胞膜片钳技术研究一种新型非去极化停跳液作用后心肌细胞离子通道的特性,并与其他停跳液进行对比。

  方法:原代培养Sprague-Dawley乳鼠心肌细胞,随机分为对照(Con)组、缺血再灌注(IR)组、St. Thomas(ST)液组、Histidine-tryptophan-ketoglutarat (HTK)液组和心脏非去极化停跳液(Nondepolarizing cardiplegia,NDP)组。Con组:体外培养18~48小时;IR组:体外培养18~48小时后,模拟缺血缺氧处理3小时,模拟再灌注处理1小时;其余组:与IR组处理相同,但在IR期间分别加入ST、HTK和NDP液对心肌进行保护。采用膜片钳全细胞模式记录并比较各组心肌细胞钠通道电流(INa)和L-型钙通道电流(ICa-L)的特性。

  结果:实验组心肌细胞INa峰值电流密度高于Con组(-186.4±35.7)(P<0.05),IR组(-674.2±88.6)和ST组(-475.3±131.4)INa电流密度高于HTK组(-336.2±69.2)和NDP组(-303.4±37.8)(P<0.05),且IR组电流密度比ST组高(P<0.05);IR组稳态激活曲线较其他组右移,其半激活电压(V1/2ac)和斜率(kac)明显高于其他组(P<0.05);实验组稳态失活曲线较Con组右移,其中IR组较其他实验组右移更明显;实验组较对照组失活后恢复曲线左移,IR组时间常数τ值明显小于ST、HTK和NDP组,HTK与NDPτ值无显著差异。Con(-6.7±3.9)、HTK(-9.0±3.8)、NDP(-8.4±2.6)组的ICa-L峰值电流密度明显低于IR(-15.1±8.8)和ST(-11.4±6.7)组;实验组与Con组相比,稳态激活曲线右移,但V1/2 ac和kac无显著性差别;实验组失活曲线较Con组右移,IR和ST组右移更加明显;IR和ST组较其他组恢复曲线左移,但各组τ值无统计学差异。

  结论:心脏停跳液可减轻由缺血再灌注损伤后心肌细胞的钠通道电流和L-型钙电流强度,有效减少钠离子和钙离子的内流,降低细胞内钙、钠超载,减轻心肌缺血再灌注损伤。与高钾ST液相比,HTK液和非去极化NDP液的这种保护作用更明显。NDP液的保护效果优于HTK液,但需加大样本量并结合分子生物学方法深入探讨。

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