ShRNA介导的Smad4基因沉默对C2C12成肌细胞纤维化的影响
近日，复旦大学附属华山医院运动医学科研究人员发表论文，旨在研究慢病毒介导的Smad4-shRNA对TGF-β1诱导的纤维化进程的影响。研究指出，降低Smad4表达能有效抑制成肌细胞及受TGF-β1诱导成肌纤维细胞的纤维化过程，提示Smad4可能成为拮抗骨骼肌纤维化的靶点。该文发表在2011年第12期《 中国运动医学杂志》上。
近日，复旦大学附属华山医院运动医学科研究人员发表论文，旨在研究慢病毒介导的Smad4-shRNA对TGF-β1诱导的纤维化进程的影响。研究指出，降低Smad4表达能有效抑制成肌细胞及受TGF-β1诱导成肌纤维细胞的纤维化过程，提示Smad4可能成为拮抗骨骼肌纤维化的靶点。该文发表在2011年第12期《 中国运动医学杂志》上。
（1）设计并选择抑制效能最高的Smad4-shRNA，包装生产慢病毒，转染C2C12成肌细胞，并检测转染后细胞的Smad4表达；（2）根据TGF-β1诱导C2C12成肌细胞向成肌纤维细胞分化的模型，以慢病毒介导的Smad4-shRNA转染细胞，将不同处理的细胞分为A、B、C、D四组，分别为C2C12细胞组、TGF-β1诱导组、C2C12细胞转染组和TGF-β1诱导后转染组。通过荧光Realtime-PCR和Westerblot检测各组collagen I和α-SMA表达水平。
（1）慢病毒介导Smad4-shRNA1转染C2C12细胞后，其Smad4 mRNA和蛋白表达显著低于未转染组（P<0.05）；（2）TGF-β1诱导组α-SMA和Collagen I mRNA及蛋白表达均显著高于C2C12细胞组（P<0.05）；（3）TGF-β1诱导后转染组α-SMA与collagen I mRNA及蛋白表达显著低于TGF-β1诱导组（P<0.05），与C2C12细胞组和C2C12细胞转染组相比则无明显差异（P>0.05）。
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