非酒精性脂肪肝病是目前严重危害中国城乡居民身体健康的疾病,随着人民生活的改善,脂肪肝的发病率逐年增高,然而其发病机制至今尚未完全阐明,目前在临床上也缺乏十分有效的防治手段。芥菜籽为十字花科芸苔属植物的种子,具有抗癌、抗炎、抗菌、抗氧化等多种生理功能。本研究的目的是获得芥菜籽预防肝脂肪变性的可靠证据,阐明芥菜籽在动物体内抑制氧化应激和脂质过氧化的作用机制,为芥菜籽作为治疗NAFLD可行性药物提供更充分的科学依据。
目的 非酒精性脂肪肝病是目前严重危害中国城乡居民身体健康的疾病,随着人民生活的改善,脂肪肝的发病率逐年增高,然而其发病机制至今尚未完全阐明,目前在临床上也缺乏十分有效的防治手段。芥菜籽为十字花科芸苔属植物的种子,具有抗癌、抗炎、抗菌、抗氧化等多种生理功能。本研究的目的是获得芥菜籽预防肝脂肪变性的可靠证据,阐明芥菜籽在动物体内抑制氧化应激和脂质过氧化的作用机制,为芥菜籽作为治疗NAFLD可行性药物提供更充分的科学依据。
方法 以乙醚为溶剂利用索氏提取法提取芥菜籽有效成分,高效液相色谱法(HPLC测定提取物的浓度。实验分为5组:第一组为对照组,第二组:oxLDL,第三组:oxLDL + SB203580(p38抑制剂),第四组:oxLDL + PD98059(ERK抑制剂),第五组:oxLDL + SP600125(JNK抑制剂)。观察oxLDL对HepG2细胞脂肪样变的作用及娌俗训脑し雷饔谩T?孔板种植肝细胞(HEPG2 Cell),使细胞数为 5X10*5/ML,细胞贴壁后加入芥菜籽干预,SB、PD、SP抑制1小时后,用oxLDL刺激,oxLDL 的浓度为 50ug/ml,刺激后,孵育48小时。选用流式细胞仪检测脂肪性变细胞的含量变化。油红染色观察细胞形态的变化。
结果 流式细胞术的结果显示,与对照组相比,oxLDL+PD组的脂肪性变细胞含量明显减少,而oxLDL+SP和 oxLDL + SB组,脂肪样变细胞的含量并无差异,荧光强度统计结果与流式细胞图结果一致:oxLDL+PD荧光强度较oxLDL组降低,说明脂肪样变细胞含量减少。油红染色结果显示,与oxLDL组相比,加入ERK通路阻滞剂的oxLDL+PD组,脂肪变性数量明显减少,与control组无差别,而加入JNK阻滞剂和p38阻滞剂组的脂肪变细胞数量则与oxLDL组无差别。
结论 氧化低密度脂蛋白可以引起HepG2细胞的脂肪性变,但是芥菜籽可以预防脂肪形变,其抑制作用是通过阻断ERK通路实现。氧化低密度脂蛋白通过ERK通路介导脂肪样变;芥菜籽抵制氧化低密度脂蛋白引起的脂肪样变。
(摘自2012中国消化系疾病学术大会论文集)
2012CCDD专题链接:http://zt.cmt.com.cn/zt/2012CCDD/index.html
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