Nucleic Acids Res：新方法实现CRISPR/Cas9瞬时表达和高效编辑
在一项新的研究中，来自美国维克森林大学再生医学研究所（WFIRM）的研究人员找到了一种更好的递送DNA编辑工具CRISPR/Cas9的方法来缩短它们在细胞中的存在时间，他们称之为“打了就跑（hit and run）”方法。相关研究结果于2019年2月13日在线发表在Nucleic Acids Research期刊上，论文标题为“Delivering SaCas9 mRNA by lentivirus-like bionanoparticles for transient expression and ef
CRISPR(规律间隔性成簇短回文重复序列)技术用于改变DNA序列和修饰基因功能。 CRISPR/Cas9是一种核酸酶，能够像一把剪刀那样在特定位点上切割两条DNA链以便添加、移除或修复DNA片段。但是，CRISPR/Cas9不是100%准确，可能会切割脱靶位点，从而导致不想要的结果。
论文共同通讯作者、维克森林大学再生医学研究所再生医学助理教授Baisong Lu博士说道，“CRISPR/Cas9 mRNA技术面临的主要挑战之一是可能发生导致肿瘤或突变的脱靶切割。”虽然其他类型的慢病毒样生物纳米颗粒(lentivirus-like bionanoparticle, LVLP)已用于递送蛋白或mRNA，但Lu说，“我们开发的LVLP具有独特的功能，这将使它成为一种扩展基因组编辑工具箱的有用工具。”
为了解决这一不准确问题，这些研究人员提出了一个问题：是否有办法高效地递送Cas9基因同时让这种基因组编辑蛋白瞬时表达?他们测试了各种策略，然后利用两种广泛使用的递送载体---慢病毒载体和纳米颗粒---的最佳特性，并将它们组合在一起，构建出一种高效地将Cas9 mRNA包装到LVLP中的系统，从而实现Cas9的瞬时表达和高效编辑。
慢病毒载体是一种在研究实验室中广泛使用的基因递送载体，并且已广泛地用于递送CRISPR/Cas9 mRNA以便进行高效的基因组编辑。纳米颗粒也被使用，但是在递送CRISPR/Cas9方面不那么有效。
论文共同通讯作者、维克森林大学再生医学研究所主任 Anthony Atala博士说道，“通过将纳米颗粒递送策略的瞬时表达特征与慢病毒载体的转导效率结合在一起，我们构建出一种可用于包装多种Cas9 mRNA的系统，并以一种‘打了就跑’的方法进行基因组编辑。这种系统将不仅提高安全性，还避免潜在地对Cas9产生免疫反应，这可能提高体内基因编辑效率，因而对研究和临床应用是非常有用的。”
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