将Cas9与染色质调节肽进行融合,可提高CRISPR-Cas9编辑效率
通过Cas9核酸酶靶向感兴趣位点的CRISPR基因组编辑工具在效率上差异很大。在一项新的研究中,来自MilliporeSigma公司的研究人员报道一种新的称为CRISPR-chrom的染色质调节肽(chromatin-modulating peptide, CMP)融合策略可将CRISPR-Cas9的基因组编辑活性提高数倍。CRISPR-chrom是通过将Cas9与CMP融合在一起形成的。相关研究结果于2019年2月21日在线发表在The CRISPR Journal期刊上,论文标题为“Improving CRISPR-Cas9 Genome Editing Efficiency by Fusion with Chromatin-Modulating Peptides”。
在这项新的研究中,MilliporeSigma公司的Fuqiang Chen及其团队开发出他们利用已知与染色质天然地相互作用的肽对Cas9进行修饰的方法。他们证实通过采用CRISPR-chrom 策略,CRISPR-Cas9的编辑活性显著增加,特别是在之前很难靶向的位点上。他们还报道了脱靶效应没有显著增加。此外,他们还使用了与流行的SpyCas9存在垂直同源关系的Cas9蛋白进行概念验证,从而进一步扩展了CRISPR工具包并为进行多重编辑提供了新的机会。
CRISPR Journal主编Rodolphe Barrangou博士说,“对于增强的CRISPR工具箱来说,这是一个值得注意的技术改进。这种方法改善了对之前难以靶向的位点的编辑结果。CRISPR-chrom与改善的向导RNA(gRNA)支架相结合会提高我们灵活地靶向基因组的能力。”
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