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抗人LOC339524单克隆抗体的制备和应用

作者：杨俊岭整理来源：日期：2016-05-12

导读

　　近期，第三军医大学第二附属医院麻醉科研究人员发表论文，旨在制备特异性抗人LOC339524的单克隆抗体（mAb）并进行应用。研究指出，成功制备了特异性好、效价高的抗人LOC339524蛋白mAb。该文发表在2015年第12期《细胞与分子免疫学杂志》上。　　将LOC339524蛋白的非糖基化抗原序列的编码基因进行三段重复表达，合成的基因克隆到质粒pET28a上。采用大肠杆菌表达系统获得LOC

　　近期，第三军医大学第二附属医院麻醉科研究人员发表论文，旨在制备特异性抗人LOC339524的单克隆抗体（m Ab）并进行应用。研究指出，成功制备了特异性好、效价高的抗人LOC339524蛋白m Ab。该文发表在2015年第12期《细胞与分子免疫学杂志》上。

　　将LOC339524蛋白的非糖基化抗原序列的编码基因进行三段重复表达，合成的基因克隆到质粒p ET28a上。采用大肠杆菌表达系统获得LOC339524重组蛋白，以此作为免疫原免疫BALB/c小鼠，获得m Ab。ELISA测定抗体特异性及效价。Western blot法鉴定LOC339524重组蛋白、免疫组织化学技术分别检测人心肌组织和H9C2细胞中LOC339524蛋白的表达，采用制备的抗体检测不同心脏病患者血清LOC339524水平。

　　结果显示，筛选出2株能稳定分泌抗人LOC339524蛋白m Ab的杂交瘤细胞株，5-D3和4-F8。其中5-D3效价高于4-F8，达2×106。Western blot法、免疫组织化学技术证明5-D3能特异性识别人和大鼠LOC339524蛋白，应用制备的抗体可成功检测不同心脏病患者血清LOC339524的水平。