近期,中国医科大学附属一院眼科研究人员发表论文,旨在研究视网膜色素上皮(retinalpigmentepithelium,RPE)细胞吞噬功能与MERTK受体及其下游信号通路Ras-MEK-MLCK-肌球蛋白的关系。研究指出,Ras-MEK-MLCK-肌球蛋白通路是鼠RPE细胞吞噬过程中MERTK受体激活的下游信号通路。该文发表在2016年第01期《国际眼科杂志》上。 用视细胞外节膜盘(
近期,中国医科大学附属一院眼科研究人员发表论文,旨在研究视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞吞噬功能与MERTK受体及其下游信号通路Ras-MEK-MLCK-肌球蛋白的关系。研究指出,Ras-MEK-MLCK-肌球蛋白通路是鼠RPE细胞吞噬过程中MERTK受体激活的下游信号通路。该文发表在2016年第01期《国际眼科杂志》上。
用视细胞外节膜盘(rod outer segments,ROS)于37℃孵育离体培养的3~5代C57小鼠RPE细胞,在孵育0、30、60、120、180、240min终止吞噬反应。双重荧光标记法检测RPE细胞吞噬动力学;以MERTK及Ras抗体、磷酸化MEK及MLCK抗体应用Western-Blot方法检测不同孵育时间(30、60、120、180min)MERTK、Ras、MEK及MLCK的激活状态;以瞬时转染质粒方法抑制Ras及MERTK基因表达后,再次以Western-Blot方法检测对应时间MERTK-Ras通路激活状态及吞噬功能的变化。
C57小鼠RPE细胞吞入ROS发生在孵育30min,并在3h达到饱和。在吞噬过程中,随着孵育时间的延长,RPE细胞MERTK、Ras、MEK和MLCK的蛋白表达水平不断增多(与对照组相比,P<0.05)。Ras及MERTK干扰后的RPE细胞与ROS共孵育(30、60、120、180min)的全过程中,MERTK、Ras、MEK和MLCK的蛋白表达及ROS的吞人数量始终维持较低水平,仅在孵育180min见到少量ROS吞入;与未转染RPE细胞相比,siRas-RPE细胞及siMERTK-RPE细胞与ROS共孵育120、180min时,MERTK、Ras、MEK及MLCK的蛋白表达量均明显减少(P<0.05)。
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