BAG4过表达重组质粒构建及转染结肠癌SW480细胞的鉴定
作者：杨艳辉 整理 来源： 日期：2016-05-03
导读
近期，乐山市人民医院消化内科研究人员发表论文，旨在构建BAG4（Bcl-2-associatedathanogene）基因过表达重组质粒，转染结肠癌细胞株，并对其是否转染成功进行鉴定。研究指出，成功构建BAG4基因过表达重组质粒，并有较高的转染水平，为进一步的研究提供了条件。该文发表在2015年第06期《西南军医》杂志上。 Real-time聚合酶链反应（PCR）检测和筛选6株结肠癌细胞
近期，乐山市人民医院消化内科研究人员发表论文，旨在构建BAG4（Bcl-2-associated athanogene）基因过表达重组质粒，转染结肠癌细胞株，并对其是否转染成功进行鉴定。研究指出，成功构建BAG4基因过表达重组质粒，并有较高的转染水平，为进一步的研究提供了条件。该文发表在2015年第06期《西南军医》杂志上。
Real-time聚合酶链反应（PCR）检测和筛选6株结肠癌细胞BAG4m RNA表达。采用全基因合成法合成BAG4编码区序列，克隆入p EGFP-C1载体末端，构建重组质粒p EGFP-Cl-BAG4并DNA测序，以500ul脂质体质粒复合物瞬时转染SW480细胞，Western blot（鼠抗人BAG4单抗1：500）、RT-PCR等检测目的基因表达效率。
6株细胞中，HT29和SW480细胞BAG4 m RNA及蛋白水平最低。测序结果表明BAG4重组质粒构建成功。瞬时转染SW480细胞后，BAG4 m RNA分别升高约100倍，并BAG4蛋白表达也明显升高。
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