小干扰RNA沉默HIF-1α对缺氧状态下脉络膜黑色素瘤细胞中MMP-2表达的影响
近期，中国山东省青岛市市立医院研究人员发表论文，旨在以小干扰RNA沉默人眼脉络膜黑色素瘤细胞中的低氧诱导因子-1（hypoxiainduciblefactor-1，HIF-1）基因，在缺氧状态下观察其对人眼脉络膜黑色素瘤（humanuvealmelanomacell，OCM-1）细胞中基质金属蛋白酶-2（matrixmetalloproteinase-2，MMP-2）基因表达的影响。研究指出
近期，中国山东省青岛市市立医院研究人员发表论文，旨在以小干扰RNA沉默人眼脉络膜黑色素瘤细胞中的低氧诱导因子-1（hypoxia inducible factor-1，HIF-1）基因，在缺氧状态下观察其对人眼脉络膜黑色素瘤（human uveal melanoma cell，OCM-1）细胞中基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinase-2，MMP-2）基因表达的影响。研究指出，缺氧条件下可以提高人眼脉络膜黑色素瘤细胞中HIF-1α蛋白的表达，而且HIF-1α蛋白的表达水平可以影响MMP-2的转录与翻译，从而可能进一步影响人眼脉络膜瘤细胞的外周浸润和远处转移能力。该文发表在2015年第06期《国际眼科杂志》上。
将脉络膜黑色素瘤细胞分为正常组与缺氧组，其中将缺氧组再分成单纯缺氧组、干扰组、脂质体对照组、阳性对照组和阴性对照组；对正常组细胞用含有浓度为10%的胎牛血清和1%的双抗（青-链霉素混合液）的DMEM高糖培养基进行培养。在缺氧组人眼OCM-1细胞的培养瓶中加入100μmol/L CoC l2以构建肿瘤细胞内部的缺氧微环境。干扰组转染HIF-1αsiRNA，阴性对照组转染无义siRNA，阳性对照组转染β-actin siRNA，脂质体对照组转染空脂质体。RT-PCR检测细胞中HIF-1α和MMP-2 mRNA的表达，行Western-blot检测HIF-1α和MMP-2蛋白的表达。
与正常组相比，单纯缺氧组HIF-1α蛋白的表达增高（P<0.05），而其mRNA表达量无明显变化（P>0.05）；MMP-2 mRNA及蛋白的表达升高（P<0.05）。缺氧培养的各组之间相比，阳性对照组β-actin mRNA表达下降（P<0.05），证实转染成功；干扰组HIF-1αmRNA和MMP-2mRNA和蛋白表达均下降（P<0.05），阴性对照组、脂质体对照组各检测因素均无明显差别（P>0.05）。
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