PAX3对靶基因MITF转录活性调控的实验研究
近期，上海交通大学医学院附属仁济医院耳鼻咽喉科研究人员发表论文，旨在探讨配对盒基因（pairbox3，PAX3）突变对小眼球畸形相关转录因子（microphthalmia-associatedtranscriptionfactor，MITF）基因转录活性的影响及其在I型Waardenburg综合征（Waardenburgsyndrome，WS）发病中的作用。研究指出，H80D和H186fsX
近期，上海交通大学医学院附属仁济医院耳鼻咽喉科研究人员发表论文，旨在探讨配对盒基因（pair box 3，PAX3）突变对小眼球畸形相关转录因子（microphthalmia-associated transcription factor，MITF）基因转录活性的影响及其在I型Waardenburg综合征（Waardenburg syndrome，WS）发病中的作用。研究指出，H80D和H186fsX5影响靶基因MITF转录活性，使其表达下调、黑色素合成减少，以单倍体剂量不足效应致I型WS。该文发表在2015年第05期《听力学及言语疾病杂志》上。
野生型PAX3及其致病突变H80D和H186fsX5表达质粒瞬时转染293T细胞，应用荧光素酶活性检测系统对MITF报告基因活性检测，观察野生/突变PAX3蛋白对其靶基因MITF转录活性的调控作用及二个突变蛋白对野生PAX3蛋白功能的影响；应用生物素标记的含序列attaat的DNA寡核苷酸链探针分别沉淀PAX3、H80D和H186fsX5蛋白，检测野生/突变PAX3蛋白与靶基因MITF启动子的结合力。
尽管H80D蛋白仍残余部分功能可增加MITF启动子转录活性，但与野生PAX3蛋白相比，二者差异有显著统计学意义（P<0.01），而H186fsX5蛋白则完全失去调控MITF启动子转录活性作用（P<0.01）；二者均未对野生PAX3蛋白功能产生显性负效应作用（P>0.05）。突变H80D蛋白与野生PAX3蛋白均可与MITF启动子特异DNA序列attaat结合，而突变H186fsX5蛋白则不能与之结合。
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