融合蛋白GST-反式转录激活因子蛋白-增强型绿色荧光蛋白表达及对血迷路屏障作用
近期，首都医科大学附属北京同仁医院耳鼻咽喉头颈外科耳鼻咽喉头颈科学教育部重点实验室（首都医科大学）北京市耳鼻咽喉科研究所研究人员发表论文，旨在表达并纯化融合蛋白GST-反式转录激活因子蛋白-增强型绿色荧光蛋白（GST-transactivatoroftranscription-enhancedgreenfluorescenceprotein，GSTTAT-EGFP），并研究其是否能跨越血迷路
近期，首都医科大学附属北京同仁医院耳鼻咽喉头颈外科耳鼻咽喉头颈科学教育部重点实验室（首都医科大学）北京市耳鼻咽喉科研究所研究人员发表论文，旨在表达并纯化融合蛋白GST-反式转录激活因子蛋白-增强型绿色荧光蛋白（GST-transactivator of transcription-enhanced green f luorescence protein，GSTTAT-EGF P），并研究其是否能跨越血迷路屏障（blo o d labyrinth barrir，BLB）进入内耳。研究指出，短肽TAT可转导大分子蛋白通过BLB进入内耳，为外源性蛋白药物治疗内耳疾病提供新手段。该文发表在2015年第11期《中国耳鼻咽喉头颈外科》杂志上。
用基因重组技术将编码TAT蛋白11个氨基酸短肽基因和EGFP基因重组，分别构建p GEX-6p-1-TAT-EGFP和p GEX-6p-1-EGFP表达载体，将载体分别转化大肠杆菌BL21（DE3），经IPTG诱导表达融合蛋白，用GST树脂柱亲和层析纯化融合蛋白。将10只豚鼠随机分为两组，分别肌肉注射GST-EGFP和GST-TATEGFP；2～4 h后豚鼠经麻醉、断头取耳蜗等组织。用2%多聚甲醛固定，耳蜗经10%EDTA（p H7.4）脱钙、OCT包埋，制备颞骨冰冻切片，采用免疫组化技术和荧光显微镜技术观察TAT短肽是否可以携带分子量55 k D的GST-EGFP跨越BLB进入内耳。
GST-TAT-EGFP进入内耳后主要分布于血管纹和螺旋器，而对照组EGFP不能进入内耳。
相关链接：http://med.wanfangdata.com.cn/Journal/ebyhtjwk.aspx
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