耳鼻咽喉

喉癌Hep-2细胞来源的exosomes提取方法的比较

作者:杨俊岭 整理 来源:金宝搏网站登录技巧 日期:2016-04-19
导读

           近期,广州市第一人民医院耳鼻咽喉科研究人员发表论文,旨在对分离提取喉癌Hep-2细胞来源的exosomes2种方法进行对比,展现不同方法的优缺点,为选择分离提取包括喉癌Hep-2细胞在内的肿瘤细胞来源exosomes的方法提供参考。研究指出,2种方法各具特点,均是较理想的exosomes分离提取方法。利用ExosomeIsolationKit分离提取exosomes具有样本量少、提取时间短、

  近期,广州市第一人民医院耳鼻咽喉科研究人员发表论文,旨在对分离提取喉癌Hep-2细胞来源的exosomes 2种方法进行对比,展现不同方法的优缺点,为选择分离提取包括喉癌Hep-2细胞在内的肿瘤细胞来源Exosomes的方法提供参考。研究指出,2种方法各具特点,均是较理想的exosomes分离提取方法。利用Exosome Isolation Kit分离提取exosomes具有样本量少、提取时间短、步骤简单、产物量大等优点,为喉癌Hep-2来源exosomes的分离提取提供了较好的选择。该文发表在2015年第17期《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》上。

  大量培养喉癌Hep-2细胞,42℃热休克处理。收集90ml培养上清液,先通过3/0.8μm深层过滤小型滤芯对上清液进行预处理,去除直径较大的颗粒和杂质,再利用蔗糖密度梯度离心联合超滤离心法,将上清液浓缩提纯;收集培养上清液4ml,依次加入Exosome Isolation Kit内试剂,通过exosomes提取专用过滤柱,收集浓缩液。用高倍透射电子显微镜对2种方法所得的exosomes浓缩液分别鉴定,作出评价。

  2种方法均能成功地从喉癌Hep-2细胞培养上清液中分离提取出exosomes。单个高倍视野下,蔗糖密度梯度离心联合超滤离心法提取exosomes分散性较好,但密度较低,背景见杂质较多;Exosome Isolation Kit所提取exosomes排列紧密,密度较高,背景杂质较少。

   相关链接:http://med.wanfangdata.com.cn/Journal/lcebyhkzz.aspx

  

  

  

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