Notch信号对高糖诱导人视网膜血管内皮细胞凋亡的保护作用
近期，大连市大连医科大学附属第一医院眼科研究人员发表论文，旨在探讨Notch1信号对高糖情况下多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1[Poly（ADPribose）polymeras-1，PARP-1]和核因子-B（nuclearfactorkappaB，NF-B）的p50亚单位（NF-B50）介导的人视网膜血管内皮细胞（retinalvascularendothelialcells，RVECs）凋亡
近期，大连市大连医科大学附属第一医院眼科研究人员发表论文，旨在探讨Notch1信号对高糖情况下多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1[Poly（ADPribose）polymeras-1，PARP-1]和核因子-κB（nuclear factor kappa B，NF-κB）的p50亚单位（NF-κB50）介导的人视网膜血管内皮细胞（retinal vascular endothelial cells，RVECs）凋亡的抑制作用。研究指出，高糖情况下Notch信号可调控PARP-1和NF-κB的相互作用，并抑制PARP-1激活引起的人RVECs的凋亡。该文发表在2015年第09期《眼科新进展》杂志上。
体外培养人RVECs及HEK293T细胞，并进行传代，同时构建高糖（葡萄糖浓度为30 mmol·L-1）人RVECs细胞模型。构建p CMV-ScriptNotch1和p CMV-Script-DLL4质粒，酶切鉴定后Western Blot法检测重组质粒表达目的基因的效果，同时合成si Notch1并转染高糖培养的人RVECs，Western Blot法检测Notch基因敲除效果。应用免疫共沉淀及Western Blot法检测si Notch1对高糖下PARP-1和NF-κB的相互作用的影响；应用Western Blot法检测高糖条件下Notch1/DLL4上调和下调后人RVECs中PARP-1、p-AKT、NF-κB50及caspase-3的表达变化。
人RVECs复苏后24 h贴壁，细胞呈扁平梭形，3 d左右细胞开始融合呈铺路石样，单层生长，铺满瓶底，并可见接触抑制现象。免疫共沉淀结果显示高糖组培养的人RVECs其PARP-1结合的NF-κB50的量较正常对照组增加；将si Notch1转染高糖组培养的人RVECs后或同时加入DLL4，则人RVECs中PARP-1结合的NF-κB50的量较前增加显著，提示Notch能抑制高糖下PARP-1和NF-κB50的相互作用。Western Blot检测结果显示高糖条件下，Notch1和DLL4上调后其PARP-1及caspase-3表达量较前显著降低；Notch1下调后其PARP-1及caspase-3表达量较前增加；p-AKT表达量则相反；提示Notch信号能抑制高糖诱导的PARP-1及caspase-3的激活及表达。
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