沉香DNA的提取及其ITS2-PCR体系的优化
近期，广东药学院药科学院研究人员发表论文，旨在建立沉香的总DNA提取方法及rDNA第二内转录间隔区序列（ITS2）聚合酶链式反应（PCR）扩增体系。研究指出，CTAB法联合DNA试剂盒法可简单、快速获得高质量沉香总DNA，正交试验可快速获得ITS2目的片段，为沉香的分子鉴定和系统发育分析提供参考。该文发表在2015年第02期《中国实验方剂学杂志》上。 分别采用改良的CTAB法、改良的CT
近期，广东药学院药科学院研究人员发表论文，旨在建立沉香的总DNA提取方法及r DNA第二内转录间隔区序列（ITS2）聚合酶链式反应（PCR）扩增体系。研究指出，CTAB法联合DNA试剂盒法可简单、快速获得高质量沉香总DNA，正交试验可快速获得ITS2目的片段，为沉香的分子鉴定和系统发育分析提供参考。该文发表在2015年第02期《中国实验方剂学杂志》上。
分别采用改良的CTAB法、改良的CTAB法联合DNA提取试剂盒法及DNA提取试剂盒法提取沉香总DNA，利用通用引物ITS2P1/ITS2P2扩增r DNA ITS2目的片段，通过正交试验优选沉香的PCR扩增条件并对目的片段进行测序。
结果显示， 改良的CTAB法联合DNA提取试剂盒法提取总DNA的A260 nm/A280 nm1.79，质量浓度350 mg·L-1，PCR扩增目的片段产率最高。不同因素水平对沉香ITS2-PCR反应的影响顺序为模板DNA>引物>Taq DNA聚合酶>d NTP。最佳反应体系为20μL体系，DNA模板40 ng，引物0.2 mmol·L-1，d NTP 0.5 mmol·L-1，Taq DNA聚合酶1.5 U。测序获得的目前片段长度230 bp，与Gen Bank中瑞香科沉香属白木香序列相似性100%。
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