白纹伊蚊唾液腺34 ku-2基因克隆与原核表达
近期，贵阳医学院基础医学院人体寄生虫学教研室研究人员发表论文，旨在克隆并表达白纹伊蚊唾液腺Aalb34ku-2蛋白。研究指出，成功构建pET28a（+）-Aalb34ku-21重组原核表达质粒并表达出融合蛋白，为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础。该文发表在2015年第02期《中国病原生物学杂志》上。 根据白纹伊蚊（罗马株）34ku-2开放读码框序列（Aalb34ku-2）（GenBank
近期，贵阳医学院基础医学院人体寄生虫学教研室研究人员发表论文，旨在克隆并表达白纹伊蚊唾液腺Aalb34ku-2蛋白。研究指出，成功构建pET28a（+）-Aalb34ku-21重组原核表达质粒并表达出融合蛋白，为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础。该文发表在2015年第02期《中国病原生物学杂志》上。
根据白纹伊蚊（罗马株）34ku-2开放读码框序列（Aalb34ku-2）（GenBank：AY826118.1）设计特异引物，采用RT-PCR技术从白纹伊蚊广州株雌蚊体内扩增获得Aalb34ku-2基因。利用瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统中有关基因和蛋白序列的分析工具，结合其他生物信息学分析软件包，分析预测该蛋白质的结构功能；将该基因克隆到原核表达质粒pET28a（+）中，重组质粒在大肠埃希菌BL21/DE3中经异丙硫代-β-D半乳糖苷（IPTG）诱导表达，表达产物用SDS-PAGE电泳鉴定。
结果显示， RT-PCR扩增获得Aalb34ku-2 2个转录本。Aalb34ku-21序列长度为954bp，编码318个氨基酸，等电点为5.84；Aalb34ku-22的ORF为882bp，编码294个氨基酸，等电点为6.09。两者相差24个氨基酸；构建Pet28a（+）-Aalb34ku-21重组表达载体并转入大肠埃希菌E.coli BL21（DE3），IPTG诱导后得到的重组蛋白与目的蛋白分子质量（34ku）相符，经鉴定为包涵体蛋白。
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