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高分辨率熔解曲线分析在血友病B F9基因突变检测中的应用

作者：陈小姣整理来源：金宝搏网站登录技巧日期：2012-12-10

导读

近日，上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心检验科和上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科的研究人员共同发表论文，旨在利用高分辨率熔解曲线(HRM)技术建立简便有效的血友病B(HB)基因诊断的方法。研究指出HB基因诊断的新方法，即PCR-HRM筛查F9基因1～7号外显子突变结合8号外显子的DNA测序法操作简便、结果可靠。该文章发表在2012 年35卷07期《中华检验医学杂志》上。

关键字：血友病B | 因子Ⅸ | 突变 | 聚合酶链反应

　　收集2005年1月至2010年6月就诊于上海瑞金医院的55例HB患者的外周血标本，抽提外周血基因组DNA。采用PCR扩增结合测序的方法对40例HB患者进行F9基因突变检测，利用其中21例带有F9基因1～7号外显子突变的HB患者标本建立相应的HRM突变筛查方法。采用F9基因1～7号外显子的PCR-HRM突变筛查方法及8号外显子的DNA直接测序方法，对15例未知F9基因突变的HB患者进行基因诊断。

　　通过PCR扩增结合测序，40例HB患者均检测到F9基因突变。21例带有F9基因1～7号外显子突变的HB患者标本中，19例(90％)患者的突变可通过PCR-HRM技术进行检测。通过F9基因1～7号外显子PCR-HRM突变筛查及8号外显子的DNA直接测序，15例未知F9基因突变的HB患者均检测到F9基因突变。55例HB患者中共检测到34种F9基因突变。