眼科

丝裂霉素C对翼状胬肉成纤维细胞膜通透性及超微结构的影响

作者:董静文 来源:金宝搏网站登录技巧 日期:2012-12-09
导读

         日前,暨南大学附属第一医院眼科暨南大学医学院眼科研究室和暨南大学化学系的研究人员共同发表文章,旨在研究MMC对翼状胬肉成纤维细胞膜理化特性及超微结构改变的干预。研究表明,MMC能引起翼状胬肉成纤维细胞膜的理化性质改变,其作用呈剂量依赖性,细胞膜是其药效和毒性的作用靶点之一。该文章发表在《中华实验眼科杂志》2012年第30卷06期。

  日前,暨南大学附属第一医院眼科暨南大学医学院眼科研究室和暨南大学化学系的研究人员共同发表文章,旨在研究MMC对翼状胬肉成纤维细胞膜理化特性及超微结构改变的干预。研究表明,MMC能引起翼状胬肉成纤维细胞膜的理化性质改变,其作用呈剂量依赖性,细胞膜是其药效和毒性的作用靶点之一。该文章发表在《中华实验眼科杂志》2012年第30卷06期。

  该研究收集翼状胬肉手术切除标本15例,用组织块培养法培养人成纤维细胞,以波形蛋白免疫组织化学染色法对培养细胞进行鉴定。取传3代后对数生长期细胞以5×103个/孔的密度接种于96孔板,将不同质量浓度0、50、100、200、300、400 mg/L MMC加入培养孔中处理翼状胬肉成纤维细胞12h,用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测培养细胞的活力,应用Annexin V-FICT/碘化丙啶(PI)法检测细胞凋亡的情况;利用原子力显微镜(AFM)观察不同质量浓度MMC作用后人成纤维细胞膜超微结构的改变;检测细胞上清液中丙二醛( MDA)的浓度以评价细胞的脂质过氧化程度;检测细胞外液中漏出的乳酸脱氢酶(LDH)含量以评估细胞膜的通透性变化;用Fluo-3/AM标记和流式细胞术检测培养细胞内游离钙离子的变化。

  结果显示,组织块法原代培养贴壁1~2周可见大量长梭形细胞爬出,波形蛋白检测呈阳性反应。用MMC处理培养细胞12h后,人成纤维细胞的活力减弱,MMC对细胞增生的抑制作用呈剂量依赖性。0、50、100、200、300 mg/L MMC处理组细胞凋亡百分比分别为4.2%、4.2%、5.4%、19.3%和25.8%。AFM下可见不同质量浓度MMC作用后人成纤维细胞膜超微结构的异常,不同质量浓度MMC处理组细胞外液中LDH活性及细胞上清液中MDA浓度明显高于对照组,且均随着MMC质量浓度的增加,LDH活性及细胞上清液中MDA浓度逐渐增加,组间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。Fluo-3/AM标记和流式细胞术检测表明,培养细胞内游离钙离子增多。

分享:

相关文章

评论

我要跟帖
发表
回复 小鸭梨
发表

copyright©金宝搏网站登录技巧 版权所有,未经许可不得复制、转载或镜像

京ICP证120392号  京公网安备110105007198  京ICP备10215607号-1  (京)网药械信息备字(2022)第00160号
//站内统计 //百度统计 //谷歌统计 //站长统计
*我要反馈: 姓    名: 邮    箱:
Baidu
map