人羊膜上皮细胞培养液抑制角膜新生血管的实验研究
日前，暨南大学附属第一医院眼科和暨南大学医学院眼科研究室的研究人员共同发表文章，旨在研究人羊膜上皮细胞(AECs)培养液对CNV的抑制作用及机制。研究表明，人AECs培养液可抑制角膜上皮VEGF及bFGF的表达，抑制血管内皮细胞的增生和迁移，细胞结构和功能改变，这可能是其抑制CNV的机制之一。该文章发表在《中华实验眼科杂志》2012年第30卷05期。
日前，暨南大学附属第一医院眼科和暨南大学医学院眼科研究室的研究人员共同发表文章，旨在研究人羊膜上皮细胞(AECs)培养液对CNV的抑制作用及机制。研究表明，人AECs培养液可抑制角膜上皮VEGF及bFGF的表达，抑制血管内皮细胞的增生和迁移，细胞结构和功能改变，这可能是其抑制CNV的机制之一。该文章发表在《中华实验眼科杂志》2012年第30卷05期。
该研究消化法培养及鉴定人AECs，并收集培养液，酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测色素上皮衍生因子(PEDF)和白细胞介素1受体拮抗剂( IL-1Ra)在培养液中的质量浓度。兔角膜上皮细胞分离后分别用无血清DMEM培养基、人AECs培养液、混合培养液(DMEM+人AECs培养液)培养48 h，采用实时定量聚合酶链反应(QRT-PCR)法检测不同培养液培养的角膜上皮细胞中血管内皮生长因子(VEGF)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达。用含质量分数10％胎牛血清的DMEM培养基培养人脐静脉血管内皮细胞(UVECs)，并分别加入无血清DMEM、混合培养液和人AECs培养液，划痕法和细胞计数试剂盒8(CCK8)法检测各组培养液对人UVECs迁移的影响。分别在上述3种培养基中加入终质量浓度为50 μg/L的bFGF，CCK8法检测各培养液中人UVECs的增牛情况。在原子力显微镜(AFM)下观察人AECs培养液对人UVECs超微结构的影响。
结果显示，人羊膜培养和传代细胞角蛋白免疫组织化学染色阳性证实为人AECs。与无血清DMEM组相比，人AECs培养液组的兔角膜上皮细胞VEGF mRNA(1.00±0.22 vs。2.98±0.46)及bFGF mRNA( 1.00±0.36vs。2.55±0.48)的表达均明显下降，差异均有统计学意义(P=0.001、0.002)；培养后不同时间人AECs培养液组人UVECs的增生吸光度(A)值明显下降，差异均有统计学意义(P＜0.05)，人UVECs的迁移率下降，差异有统计学意义(P＜0.05)。AFM观察见人AECs培养液组的血管内皮细胞膜粗糙、表面颗粒紊乱，细胞间连接及伪足减少。ELISA法检测人AECs培养液中PEDF的质量浓度为(70.41 ±0.68) μg/L，IL-1Ra的质量浓度为(153.56±0.36) ng/L，无血清DMEM组中未检出。
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