PKM2基因沉默对人乳腺癌MCF-7细胞增殖及侵袭的影响
近期，重庆医科大学教育部临床检验诊断学重点实验室研究人员发表论文，旨在探讨M2型丙酮酸激酶（pyruvatekinaseM2，PKM2）下调对人乳腺癌MCF-7细胞增殖及侵袭的影响。研究指出，转染PKM2-shRNA特异性干扰PKM2基因的表达后，能通过下调c-myc和cyclinD1的表达抑制细胞的增殖，通过下调Bcl-2的表达以及上调Bax的表达促进细胞的凋亡。该文发表在2015年第09
近期，重庆医科大学教育部临床检验诊断学重点实验室研究人员发表论文，旨在探讨M2型丙酮酸激酶（pyruvate kinase M2，PKM2）下调对人乳腺癌MCF-7细胞增殖及侵袭的影响。研究指出，转染PKM2-sh RNA特异性干扰PKM2基因的表达后，能通过下调c-myc和cyclin D1的表达抑制细胞的增殖，通过下调Bcl-2的表达以及上调Bax的表达促进细胞的凋亡。该文发表在2015年第09期《肿瘤》杂志上。
采用免疫荧光技术检测MCF-7细胞中PKM2蛋白的表达。通过脂质体法将构建有PKM2-sh RNA的重组质粒转入MCF-7细胞；分别采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测PKM2 m RNA和蛋白的表达水平；CCK-8法、FCM法和Transwell侵袭实验分别检测PKM 2基因沉默后对MCF-7细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响；蛋白质印迹法检测对增殖相关蛋白c-myc和cyclin D1以及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的影响。
结果显示， 乳腺癌MCF-7细胞的细胞质及细胞核中均有PKM2的表达；PKM2-sh RNA质粒转染MCF-7细胞48 h后，可明显下调MCF-7细胞中PKM2 m RNA及蛋白的表达水平（P值均<0.01），并且明显抑制MCF-7细胞的增殖及侵袭能力，促进其凋亡（P值均<0.05）。沉默PKM2基因的表达，可下调c-myc、cyclin D1和Bcl-2蛋白的表达水平（P值均<0.05），而上调Bax蛋白的表达（P<0.05）。
相关文章
评论
我要跟帖
.jpg)
