重组变异链球菌表面蛋白的可溶性表达及抗体制备
近日，杭州188体育平台论坛 医院和188体育平台论坛 生物医学工程教育部重点实验室的研究人员共同发表论文，旨在探讨重组变异链球菌表面蛋白(rPAc)在大肠杆菌中可溶性表达的最佳诱导条件并制备其多克隆抗体。该研究指出，rPAc高效可溶性表达和抗rPAc多克隆抗体的制备为DNA初次免疫—蛋白质加强免疫策略的深入研究奠定了必要的物质基础。该文发表在2012年30卷03期《华西188体育平台论坛 医学杂志》上。
近日，杭州188体育平台论坛 医院和188体育平台论坛 生物医学工程教育部重点实验室的研究人员共同发表基础研究论文，旨在探讨重组变异链球菌表面蛋白(rPAc)在大肠杆菌中可溶性表达的最佳诱导条件并制备其多克隆抗体。该研究指出，rPAc高效可溶性表达和抗rPAc多克隆抗体的制备为DNA初次免疫—蛋白质加强免疫策略的深入研究奠定了必要的物质基础。该文发表在2012年30卷03期《华西188体育平台论坛 医学杂志》上。
通过改变pET20b (+)-AP/BL21 (DE3) plysS工程菌的培养条件，提高rPAc可溶性表达水平。用纯化的rPAc免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体，通过酶联免疫吸附测定(ELISA)和Western blot法鉴定抗体的免疫学活性。
pET20b(+)-AP/BL21 (DE3) plysS工程菌在Luria-Bertani (LB)培养基(pH值为7.2)上培养，至表示菌体密度的光密度值OD600nm=0.6时加入1.0 mmol·L-1异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)，30℃诱导培养4h，rPAc的可溶性表达量最高。以纯化的rPAc免疫BALB/c小鼠，制备抗rPAc多克隆抗体，ELISA法测定抗体效价为1:6000，Western blot法鉴定出该抗体可特异性识别rPAc。
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