在多种组织内,碱性成纤维生长因子(bFGF)对细胞增殖、分化和细胞外基质的更新发挥着不同作用。然而,bFGF对牙髓细胞的作用却知之甚少。这项研究是为了阐明bFGF是否会影响人牙髓细胞(HDPCs)的分化和基质更新以及相关基因蛋白的表达,并探讨丝裂原活化蛋白激酶(MEK)/胞外信号调节激酶(ERK)信号通路在这一过程中发挥的作用。
研究通过逆转录多聚酶链反应检测HDPCs中FGFR1和FGFR2的表达情况。随后,向HDPCs施加不同浓度bFGF刺激,3-(4,5-dimethyl-thiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide测定细胞增殖情况;碱性磷酸酶(ALP)检测细胞分化情况;逆转录多聚酶链反应检测细胞周期蛋白B1和金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)1的mRNA表达变化;Westernblot检测cdc2,TIMP-1,TIMP-2和I型胶原蛋白表达情况。另外,使用U0126检测MEK/ERK信号通路活性变化。
结果显示,HDPCs表达FGFR1和FGFR2。bFGF浓度为50-250ng/mL时,细胞活力正常。10-500ng/mL的bFGF会抑制ALP蛋白表达和酶活性。然而,在相似的浓度,bFGF却可以促进HDPCs内cdc2、细胞周期蛋白B1和TIMP-1mRNA和蛋白的表达,但部分抑制I型胶原的表达,而对TIMP-2没有明显影响。向细胞施加U0126(MEK/ERK抑制剂)刺激,可以减弱bFGF诱导的细胞周期蛋白B1、cdc2和TIMP-1的表达上调。
结论:bFGF可能通过激活FGFR调节HDPCs生长,进而参与调控牙髓的修复和再生。另外,bFGF部分通过MEK/ERK信号通路,促进cdc2、细胞周期蛋白B1和TIMP-1的表达,并部分抑制ALP活性。
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