胆固醇敏感器SCAP功能失调对THP-1源性巨噬细胞炎症因子表达的影响
近期，重庆医科大学附属第一医院肾脏内科研究人员发表论文，旨在观察胆固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白（sterolregulatoryelementbindingproteinscleavage-activatingprotein，SCAP）功能失调对THP-1源性巨噬细胞脂质代谢及IL-1、MCP-1表达的影响，探讨SCAP的促炎作用是否依赖于其介导的胆固醇稳态调节功能。研究指出，胆固醇敏感
近期，重庆医科大学附属第一医院肾脏内科研究人员发表论文，旨在观察胆固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白（sterol regulatory element binding proteins cleavage-activating protein，SCAP）功能失调对THP-1源性巨噬细胞脂质代谢及IL-1β、MCP-1表达的影响，探讨SCAP的促炎作用是否依赖于其介导的胆固醇稳态调节功能。研究指出，胆固醇敏感器SCAP功能失调促进THP-1源性巨噬细胞内炎症因子IL-1β、MCP-1表达，增加成熟IL-1β的生成及其向细胞外分泌；SCAP这一新发现的功能不依赖于其介导的胆固醇稳态调节功能。该文发表在2016年第04期《第三军医大学学报》杂志上。
采用基因转染方法在THP-1源性巨噬细胞中过表达SCAP或沉默SCAP，结合使用炎症刺激剂LPS（1μg/m L）或SCAP转位抑制剂Betulin（3μmol/L）处理THP-1源性巨噬细胞，将细胞分为对照组、过表达SCAP组、沉默SCAP组、LPS组、沉默SCAP+LPS组、Betulin组以及过表达SCAP+Betulin组，RT-PCR法检测过表达SCAP或沉默SCAP对HMGCo AR、pro-IL-1β、MCP-1基因表达水平的影响。油红O染色观察不同组别细胞内中性脂质沉积的变化。酶法定量测定胞内胆固醇含量。Western blot法检测SCAP、pro-IL-1β以及培养上清中IL-1β的蛋白水平。
1过表达SCAP组与对照组比较，其HMGCo AR、MCP-1、proIL-1β基因表达水平升高（P<0.01），细胞内pro-IL-1β及细胞培养上清中IL-1β蛋白含量均上升（P<0.05），且细胞内总胆固醇（total cholesterol，TC）及胆固醇酯（cholesterol ester，CE）含量上升（P<0.01）。2沉默SCAP组与对照组比较，HMGCo AR、MCP-1、pro-IL-1β基因表达水平下降（P<0.05），细胞内proIL-1β及培养上清中成熟IL-1β蛋白含量均降低（P<0.05），且细胞内中性脂质蓄积减少，TC及CE含量下降（P<0.05）；沉默SCAP+LPS组与LPS组比较，MCP-1、pro-IL-1β基因表达下调（P<0.05），成熟IL-1β蛋白水平下降（P<0.05）。过表达SCAP+Betulin组与过表达SCAP组比较，HMGCo AR基因表达水平下降（P<0.05），其细胞内，TC及CE含量亦下降（P<0.05），但MCP-1、pro-IL-1β基因表达水平差异无统计学意义（P>0.05），培养上清中成熟IL-1β蛋白含量差异也无统计学意义（P>0.05）。
评论
我要跟帖
