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嵌合体真核表达质粒pVAX1-SPG的构建及表达研究

作者：杨俊岭整理来源：金宝搏网站登录技巧日期：2016-05-13

导读

　　近期，遵义市第一人民医院188体育平台论坛科研究人员发表论文，旨在构建含变异链球菌表面蛋白SpaP的P区编码基因spap-P和葡聚糖结合蛋白GbpA的葡聚糖结合区编码基因gbd的嵌合体真核表达质粒pVAX1-SPG，并观察其在哺乳动物细胞293T中的表达。研究指出，构建成功的嵌合体真核表达质粒pVAX1-SPG能在真核细胞293T中正确表达目的蛋白。该文发表在2015年第11期《牙体牙髓牙周病学杂志》上。

　　近期，遵义市第一人民医院188体育平台论坛科研究人员发表论文，旨在构建含变异链球菌表面蛋白Spa P的P区编码基因spap-P和葡聚糖结合蛋白Gbp A的葡聚糖结合区编码基因gbd的嵌合体真核表达质粒p VAX1-SPG，并观察其在哺乳动物细胞293T中的表达。研究指出，构建成功的嵌合体真核表达质粒p VAX1-SPG能在真核细胞293T中正确表达目的蛋白。该文发表在2015年第11期《牙体牙髓牙周病学杂志》上。

　　通过基因工程技术构建嵌合体真核表达质粒p VAX1-SPG，并采用脂质体转染法将其转染至293T细胞中；然后分别采用免疫组化SABC法和Western-blot检测嵌合蛋白Spa P/P-GBD在真核细胞中的表达。

　　重组真核表达质粒p VAX1-SPG经酶切、测序鉴定证实，其所携带的外源基因片段为2.4 kb的目的基因片段，序列同源性为99%；免疫组化染色结果显示，经p VAX1-SPG转染的293T细胞胞质呈棕褐色染色；Western-blot检测结果显示，分子量为72 k Da的嵌合蛋白Spa P/P-GBD能够被正确表达。