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肿瘤

AQP9过表达抑制肝癌SMMC-7721细胞裸鼠皮下移植瘤的生长及其作用机制的研究

作者:杨俊岭 整理 来源: 日期:2015-12-20
导读

  近期,重庆医科大学附属第二医院消化内科研究人员发表论文,旨在观察水通道蛋白9(aquaporin9,AQP9)对人肝癌SMMC-7721细胞裸鼠皮下移植瘤生长的影响,并初步探讨其可能的机制。研究指出,AQP9过表达抑制人肝癌SMMC-7721细胞在裸鼠皮下生长,并可能通过促进凋亡及抑制增殖两种途径参与调控,为深入研究分子机制奠定基础,且有望成为肿瘤治疗的新靶点。该文发表在2015年第07期《

关键字: | 肝细胞 | | 水通道蛋白质9 | | 小鼠 | | | 细胞凋亡 | | 细胞增殖 |

  近期,重庆医科大学附属第二医院消化内科研究人员发表论文,旨在观察水通道蛋白9(aquaporin 9,AQP9)对人肝SMMC-7721细胞鼠皮下移植瘤生长的影响,并初步探讨其可能的机制。研究指出,AQP9过表达抑制人肝癌SMMC-7721细胞在裸鼠皮下生长,并可能通过促进凋亡及抑制增殖两种途径参与调控,为深入研究分子机制奠定基础,且有望成为肿瘤治疗的新靶点。该文发表在2015年第07期《肿瘤》杂志上。

  将重组慢病毒LV-AQP9(以空载体LV-GFP作为阴性对照)导入SMMC-7721细胞中,构建SMMC-7721/LV-AQP9重组细胞。激光共聚焦显微镜下观察重组慢病毒LV-AQP9在SMMC-7721细胞中的感染效率,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测AQP9 m RNA和蛋白在SMMC-7721细胞中表达的改变。采用FCM法和DAPI染色检测细胞的凋亡情况。CCK-8法检测SMMC-7721细胞增殖能力的变化。将重组肝癌SMMC-7721/LV-AQP9细胞和SMMC-7721/LV-GFP细胞分别接种于裸鼠皮下,观察2组小鼠中移植瘤生长的情况,并采用HE染色观察移植瘤及肺组织病理学的情况,免疫组织化学法检测移植瘤中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达水平。

  结果显示, 激光共聚焦显微镜下观察发现,重组慢病毒LV-AQP9在SMMC-7721细胞中的感染效率为90%左右,且AQP9 m RNA以及蛋白在SMMC-7721细胞中的表达水平显著增加(P值均<0.01)。与空白对照组和阴性对照组(GFP组)相比,AQP9过表达组(AQP9组)细胞的总凋亡率显著增加(P<0.01);而AQP9组细胞在48~96 h各时间点的细胞增殖能力均受到抑制(P值均<0.05)。重复测量方差分析比较2组移植瘤体积的结果提示,AQP9组移植瘤体积显著小于GFP组(F分组=79.161,P分组=0.000),AQP9组皮下移植瘤生长速度明显小于GFP组(F分组×时间=18.481,P分组×时间=0.002)。AQP9组移植瘤中PCNA蛋白表达水平较GFP组下调。

   相关链接:http://med.wanfangdata.com.cn/Periodical/zl

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