近期，皖南医学院弋矶山医院创伤骨科研究人员发表论文，旨在探讨不同时间点应用低剂量甲氨蝶呤（methotrexate，MTX）对大鼠脊髓损伤（spinal cord injury，SCI）后神经细胞凋亡的作用，探讨其潜在的神经保护机制与合适的给药时机。研究指出，低剂量MTX能够通过抑制神经细胞凋亡有效阻止SCI的继发性损伤；预防性应用MTX效果优于单纯治疗性应用。该文发表在2016年第04期《中国修复重建外科杂志》上。

　　取成年雄性SD大鼠120只，体质量247～286 g，随机分为4组（n=30），分别为假手术组（A组）、对照组（B组）、MTX治疗组（C组）和MTX预防组（D组）。A组仅行椎板切除，B、C、D组采用改良Allen法制备SCI模型；C组于术后1、6、12、18、24 h，D组于术前30 min及术后6、12、18、24 h，经尾静脉注射MTX（0.5 mg/kg）；A、B组于术后1、6、12、18、24 h注射等量生理盐水。术后观察大鼠一般情况，于1、3、7、14、21 d采用BBB评分进行神经功能评估；取材行组织学观察脊髓形态学变化，免疫组织化学染色观察半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase-3）表达，TUNEL标记观察细胞凋亡水平。

　　结果显示， B、C、D组实验过程中共死亡10只大鼠，最终各组纳入25只大鼠进行观察。各时间点A组BBB评分均高于B、C、D组（P<0.05），从3 d开始C、D组评分明显高于B组（P<0.05）；D组从3 d开始均高于C组，除21 d（P>0.05）外，其余各时间点比较差异均有统计学意义（P<0.05）。组织学观察示，A组术后各时间点脊髓组织为正常结构；D组SCI程度轻于B、C组，C组轻于B组；从14 d开始，B、C、D组病变范围基本固定。各时间点B、C、D组Caspase-3及TUNEL阳性细胞数均显著多于A组，B组多于C、D组，比较差异有统计学意义（P<0.05）；C组Caspase-3阳性细胞数均多于D组，其中3、7、14 d比较差异有统计学意义（P<0.05），而TUNEL阳性细胞数仅3、7 d显著多于D组（P<0.05）。术后1、3、7、14、21 d，B、C、D组组内Caspase-3、TUNEL阳性细胞数均成正相关（P<0.05）。

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