Hey1表达对BMP-9诱导下C3H10T1/2细胞的成骨分化及增殖影响
近期，重庆医科大学附属第一医院骨科研究人员发表论文，旨在探讨Notch信号通路重要靶点Hey1表达水平改变对BMP-9诱导C3H10T1/2细胞成骨分化与增殖的影响。研究指出，Hey1表达是BMP-9诱导C3H10T1/2细胞成骨分化重要环节，同时影响细胞早期增殖。该文发表在2016年第03期《中国修复重建外科杂志》上。 构建过表达Hey1慢病毒LV-Hey1、抑制Hey1表达慢病毒LV
近期，重庆医科大学附属第一医院骨科研究人员发表论文，旨在探讨Notch信号通路重要靶点Hey1表达水平改变对BMP-9诱导C3H10T1/2细胞成骨分化与增殖的影响。研究指出，Hey1表达是BMP-9诱导C3H10T1/2细胞成骨分化重要环节，同时影响细胞早期增殖。该文发表在2016年第03期《中国修复重建外科杂志》上。
构建过表达Hey1慢病毒LV-Hey1、抑制Hey1表达慢病毒LV-sh Hey1，分别感染C3H10T1/2细胞干预Hey1表达水平，以LV-Blank（空质粒）感染C3H10T1/2细胞作为对照；以荧光显微镜对慢病毒感染效果、实时荧光定量PCR以及Western blot对Hey1表达水平进行验证，筛选不同Hey1表达水平的稳定细胞系。用含BMP-9的条件培养基诱导不同Hey1表达水平的C3H10T1/2细胞（分别为BMP-9+C3H10T1/2组、BMP-9+C3H10T1/2-Hey1组、BMP-9+C3H10T1/2-sh Hey1组），以正常培养基培养的细胞作为对照（C3H10T1/2组、C3H10T1/2-Blank组）。培养后48 h，实时荧光定量PCR及Western blot测定成骨分化相关转录因子Runx2、骨桥蛋白、骨钙素m RNA及蛋白表达水平；4、5、6、7 d行MTT检测及4、5、10 d行流式细胞仪测定细胞增殖能力；4、7 d时ELISA测定细胞ALP表达水平并行染色观察。
结果显示， 成功建立不同Hey1表达水平稳定细胞系。成骨方面，各时间点与BMP-9+C3H10T1/2组比较，BMP-9诱导下Hey1过表达的BMP-9+C3H10T1/2-Hey1组细胞Runx2、骨桥蛋白、骨钙素m RNA及蛋白表达水平以及成骨分化标志物ALP含量均显著增加（P<0.05），抑制Hey1表达的BMP-9+C3H10T1/2-sh Hey1组细胞以上指标均显著降低（P<0.05）。对细胞增殖活力影响方面，与BMP-9+C3H10T1/2组比较，BMP-9+C3H10T1/2-Hey1组MTT检测吸光度（A）值及细胞G2+S期百分比均提高（P<0.05）；而抑制Hey1表达BMP-9+C3H10T1/2-sh Hey1组以上指标均降低（P<0.05）。
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